从IVD缓冲液、洗涤液、酶结合物到校准品、质控品都始于简单的溶解、稀释与混合过程。在这个环节中，常被忽视操作就剧烈搅拌，这却潜藏着风险，足以让实验功亏一篑，让昂贵的原料付之东流，所以奉劝你，不要剧烈搅拌！

01剧烈搅拌

为什么我们会倾向于剧烈搅拌？无非是追求快速溶解、均匀混合，节省时间。振摇、强力搅拌器、高速漩涡混合...这些方法确实能迅速让粉末消失，让液体看起来“混匀”了。但这种“粗暴”的方式往往适得其反，带来许多隐患：

蛋白质变性与失活的“隐形杀手”： 许多试剂的核心是生物活性分子，如抗体、抗原、酶。这些生物大分子具有复杂而精细的空间结构，是其功能的基础。剧烈搅拌产生的强剪切力、机械应力以及伴随产生的气泡/气液界面张力，粗暴地拉扯、破坏这些精细结构，导致蛋白质变性、聚集、沉淀，最终丧失其关键的生物活性，配制洗涤液或酶稀释液时因剧烈搅拌而失活，后续的灵敏度和特异性从何谈起？

引入“隐形干扰物”气泡： 剧烈搅拌，尤其是高速漩涡混合，极易产生大量微小气泡。这些气泡的危害：

加速氧化与降解， 气泡将大量空气带入溶液。许多试剂成分，如某些酶、还原性底物（如TMB）、不饱和脂肪酸等，对氧气极其敏感。气泡的存在显著增加了它们的氧化速率，导致试剂提前失活、稳定性下降；影响移液精度，含有气泡的溶液，在移液操作（中难以准确吸取设定的体积，气泡本身占据体积或破裂时造成飞溅，都会引入误差；破坏分子复合物与稳定性， 一些复杂的试剂体系，如预包被有抗体的磁珠悬液、胶乳增强免疫比浊试剂中的胶乳颗粒-抗体复合物，或者精心配制的稳定剂/保护剂体系，其稳定性依赖于微妙的分子间作用力或物理包被状态。剧烈搅拌产生的强大物理冲击力破坏这些复合物，导致颗粒聚集、沉淀或功能基团暴露/掩蔽异常；加速化学降解与副反应， 对于一些化学性质活跃的成分，剧烈搅拌带来的局部高能量和可能的升温，加速不必要的水解反应、氧化反应或其他副反应，影响试剂的稳定性和有效期限。

02 温和混匀

理解了剧烈搅拌的危害，那么正确的溶液配制是什么？核心在于一个词：温和。目标是实现成分的完全溶解和均匀分布，同时最大限度保护活性成分、避免引入干扰如气泡、热、氧化。具体方法包括：

旋转/摇摆，这是最推荐的方式之一。将容器放在旋转混合仪或摇摆平台上，利用缓慢、持续的旋转或摇摆动作使内容物混合。这种方式对液体扰动小，产生气泡极少，非常适合大多数缓冲液、稀释液、酶溶液、抗体溶液的配制和复溶。

颠倒混匀， 对于密封良好的容器，用手腕力量轻轻、反复地颠倒几次，是简单有效的方法，关键在于动作要缓，避免剧烈晃动产生气泡。

轻柔搅拌，当必须使用搅拌棒时，选择磁力搅拌器并设置低速。使用表面光滑的搅拌子，避免尖锐边缘刮伤容器壁或产生过多涡流，目标是让溶液缓慢旋转流动，而不是形成漩涡或“龙卷风”。

分步溶解与静置，对于难溶成分或复杂配方，遵循“少量多次”原则。先加入部分溶剂，温和混匀溶解一部分，再逐步添加剩余溶剂并混匀。对于某些易产生气泡的溶液，配制后静置一段时间（如15-30分钟）让气泡自然逸出，再进行分装或使用。

对于大规模生产的体外诊断试剂，在工艺开发阶段，如各种工作液如包被液、封闭液、样品稀释液、酶结合物稀释液、底物液的配制，工程师必须设计并验证温和、可控的混合方式和参数，并固化到生产工艺规程中，确保批间一致性。